【摘要】研究結(jié)果為新型抗生素替代品開發(fā)奠定基礎(chǔ),。
??產(chǎn)氣莢膜梭菌是一種人畜共患病原菌,，嚴(yán)重威脅著公共衛(wèi)生安全?？莶菅挎邨U菌是一種安全可靠,、耐酸堿的好養(yǎng)性益生菌，屬于飼料添加劑目錄中的益生菌,。近期,，重慶市畜牧科學(xué)院動物營養(yǎng)研究所在產(chǎn)抑菌活性物質(zhì)微生物的篩選方面取得重要進展,，發(fā)掘了一株抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌性能良好的枯草芽孢桿菌,。相關(guān)成果發(fā)表在2022年7月《微生物學(xué)通報》。
??團隊通過從土壤中分離培養(yǎng)了100多株菌,，有12株菌的發(fā)酵液具有抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌的活性,，經(jīng)鑒定其中一株是枯草芽孢桿菌，命名為BS-2,。研究發(fā)現(xiàn)BS-2培養(yǎng)24小時的發(fā)酵液對革蘭氏陽性菌產(chǎn)氣莢膜梭菌（CVCC66和CVCC2027）,、金黃色葡萄球菌（ATCC29213和ATCC25923）和糞腸球菌（ATCC29212）均有較強的抑菌活性，特別是對產(chǎn)氣莢膜梭菌的抑菌活性最強,，但對大腸桿菌（CVCC1515和ATCC25922）,、雞傷寒沙門氏菌（CVCC534）和綠膿桿菌（ATCC27853）等4株革蘭氏陰性菌無抑菌活性。
??在進一步實驗中,，以產(chǎn)氣莢膜梭菌CVCC 66和CVCC 2027為指示菌,，枯草芽孢桿菌BS-2發(fā)酵12小時的抑菌活性達(dá)到最高水平，在12-24小時保持穩(wěn)定,。對BS-2抑菌活性物質(zhì)的穩(wěn)定性研究發(fā)現(xiàn),，抑菌活性物質(zhì)不屬于過氧化氫類和有機酸堿，且抑菌活性物質(zhì)耐受胰蛋白酶,、胃蛋白酶和蛋白酶K處理,，熱穩(wěn)定性較好。進一步分析抑菌物質(zhì)基因簇mRNA表達(dá),，發(fā)現(xiàn)BS-2抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌的活性物質(zhì)可能是Surfactin和Mersacidin,。以上研究結(jié)果為新型抗生素替代品開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
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??團隊通過從土壤中分離培養(yǎng)了100多株菌,，有12株菌的發(fā)酵液具有抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌的活性,，經(jīng)鑒定其中一株是枯草芽孢桿菌，命名為BS-2,。研究發(fā)現(xiàn)BS-2培養(yǎng)24小時的發(fā)酵液對革蘭氏陽性菌產(chǎn)氣莢膜梭菌（CVCC66和CVCC2027）,、金黃色葡萄球菌（ATCC29213和ATCC25923）和糞腸球菌（ATCC29212）均有較強的抑菌活性，特別是對產(chǎn)氣莢膜梭菌的抑菌活性最強,，但對大腸桿菌（CVCC1515和ATCC25922）,、雞傷寒沙門氏菌（CVCC534）和綠膿桿菌（ATCC27853）等4株革蘭氏陰性菌無抑菌活性。
??在進一步實驗中,，以產(chǎn)氣莢膜梭菌CVCC 66和CVCC 2027為指示菌,，枯草芽孢桿菌BS-2發(fā)酵12小時的抑菌活性達(dá)到最高水平，在12-24小時保持穩(wěn)定,。對BS-2抑菌活性物質(zhì)的穩(wěn)定性研究發(fā)現(xiàn),，抑菌活性物質(zhì)不屬于過氧化氫類和有機酸堿，且抑菌活性物質(zhì)耐受胰蛋白酶,、胃蛋白酶和蛋白酶K處理,，熱穩(wěn)定性較好。進一步分析抑菌物質(zhì)基因簇mRNA表達(dá),，發(fā)現(xiàn)BS-2抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌的活性物質(zhì)可能是Surfactin和Mersacidin,。以上研究結(jié)果為新型抗生素替代品開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
不同發(fā)酵時間的BS-2發(fā)酵液對產(chǎn)氣莢膜梭菌的抑菌圖
注：NB,，NB培養(yǎng)液,；0~24，1%接種過夜培養(yǎng)的種子液后培養(yǎng)0~24 h的發(fā)酵上清液?