脂肪作為能量儲存的主要形式,，在影響肉品質(zhì)方面也起到至關(guān)重要的作用,，高含量的肌內(nèi)脂肪能夠增加羊肉的嫩度,、提升口感,，是影響肉品質(zhì)的重要因素,。因此，對家養(yǎng)動物骨骼肌脂肪沉積及其調(diào)控的研究,，一直是本領(lǐng)域研究的重點和熱點問題之一,。在人、小鼠和牛上研究表明,，ASIP基因不僅能通過MC1R通路影響毛發(fā)顏色,，還能通過MC4R通路影響脂肪沉積。我院山羊遺傳資源團隊前期研究提示ASIP基因可能對山羊骨骼肌脂肪沉積具有調(diào)控作用,。然而,，關(guān)于ASIP是如何通過MC4R信號影響下游脂肪生成和代謝關(guān)鍵調(diào)控基因的表達及脂肪細胞組織形態(tài)，進而影響山羊骨骼肌脂肪沉積的機制還尚未闡明,。
近日,，該團隊在前期研究的基礎(chǔ)上，通過分析不同濃度的ASIP重組蛋白處理對羊脂肪細胞形態(tài)及脂肪相關(guān)基因表達的影響,，在細胞水平探索ASIP對脂肪沉積的生物學效應,。結(jié)果表明：
1.山羊ASIP基因在腎臟和脂肪組織中表達量最高，其他各組織表達量很低（圖1）,。說明ASIP基因在山羊脂肪組織中可能發(fā)揮著重要的作用,。
圖1 山羊ASIP基因的組織表達分析圖
2.在100nM重組ASIP蛋白誘導時能觀測到有少量脂肪滴形成，200nM重組蛋白誘導第8天后細胞內(nèi)出現(xiàn)明顯紅色脂肪滴（圖2）,；400nM重組蛋白誘導細胞內(nèi)沉積大量脂肪滴（圖2）,。表明ASIP重組蛋白能夠促進脂肪細胞滴沉積。甘油三酯含量測定結(jié)果表明：200nM和400nM重組蛋白顯著提高山羊脂肪細胞內(nèi)甘油三酯含量（P<0.05）,。
圖2 油紅O染色驗證山羊ASIP重組蛋白誘導前脂肪細胞分化和甘油三酯含量測定
3.ASIP重組蛋白誘導成脂分化過程中,，脂肪酸合成調(diào)控基因表達量顯著上調(diào)。如圖4所示,，通過檢測脂質(zhì)合成的關(guān)鍵基因FASN,、FABP4、SREBP1和PPARγ的mRNA水平,，結(jié)果顯示,，和對照組相比，200nM和400nM的重組蛋白處理原代脂肪細胞促進了脂質(zhì)合成關(guān)鍵基因的mRNA表達量極顯著上調(diào)（P<0.01）（圖3）,。
圖3重組蛋白誘導脂肪細胞中脂肪酸合成調(diào)控基因的mRNA表達量
本研究的結(jié)果對山羊肉質(zhì)性狀分子標記的開發(fā)具有潛在的應用價值,，同時也為ASIP基因在色素沉積與動物機體脂肪、能量代謝之間互作機制的探索提供理論參考,。