近日，重慶市畜牧科學(xué)院聯(lián)合中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院長(zhǎng)春獸醫(yī)研究所開發(fā)了一種抗蓖麻毒素全人單克隆抗體,，制備了基于DNA編碼的單克隆抗體（DMAbs），并驗(yàn)證了DMAbs療法對(duì)蓖麻毒素中毒的保護(hù)作用,，相關(guān)研究結(jié)果在2023年6月28日發(fā)表于《Toxicology Letters》,。
蓖麻毒素（Ricin toxin，RT）是一種致命的天然毒素, 被美國(guó)認(rèn)定為Ⅱ類生物戰(zhàn)劑,，存在于蓖麻植物（Ricinus communis）的種子中,。到目前為止，在臨床前研究中,，唯一有效的預(yù)防肺蓖麻毒素感染措施是注射抗蓖麻毒素中和抗體,。但鼠源或者人-鼠嵌合的單克隆抗體存在嚴(yán)重的HAMA反應(yīng)，而且傳統(tǒng)的單克隆抗體由于生產(chǎn)成本高,、抗體使用量大,、保存運(yùn)輸條件要求高等問(wèn)題,，極大限制了單克隆抗體的應(yīng)用范圍。全人源抗體小鼠作為開發(fā)全人單克隆抗體的核心工具動(dòng)物,，能夠直接產(chǎn)生全人單克隆抗體,，很好地解決鼠源或人-鼠嵌合抗體的HAMA效應(yīng)問(wèn)題。同時(shí),，DMAbs作為一種全新的抗體藥物遞送平臺(tái),，它不是直接給機(jī)體注射單克隆抗體，而是將編碼單克隆抗體的質(zhì)粒DNA遞送到肌肉組織中,，從而使機(jī)體直接產(chǎn)生特異性的單克隆抗體,。鑒于DNA性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定，不需要低溫保存,，而且生產(chǎn)成本低,，能夠解決傳統(tǒng)單克隆抗體在生產(chǎn)和使用過(guò)程中遇到的問(wèn)題。
我院利用全人源抗體小鼠開發(fā)了抗蓖麻毒素全人單克隆抗體（4-4E）,，與對(duì)照組相比,，抗體4-4E在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中對(duì)蓖麻毒素有很好的中和效果。隨后,，我們構(gòu)建了DMAb-4-4E質(zhì)粒,，通過(guò)肌肉電轉(zhuǎn)的方式使質(zhì)粒在肌肉組織中表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：特異性抗體在機(jī)體7天內(nèi)快速表達(dá),，主要在腸和腓腸肌中富集,。為了驗(yàn)證DMAb-4-4E在體內(nèi)誘導(dǎo)的抗體表達(dá)是否可以預(yù)防RT中毒，我們?cè)谫|(zhì)粒電轉(zhuǎn)染后的第5天用2×LD50劑量的RT攻擊小鼠,，結(jié)果表明：DMAb4-4E介導(dǎo)的抗體在體內(nèi)的表達(dá)可以很好地保護(hù)小鼠免于死亡,。此外，我們將抗體與RT蛋白進(jìn)行了分子模型對(duì)接,，發(fā)現(xiàn)在抗體保護(hù)的細(xì)胞中蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶的減少和RT在核體中的增多,，揭示了抗體中和細(xì)節(jié)的可能性機(jī)制。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持了正在開發(fā)中的RT單克隆抗體的進(jìn)一步研究,，為開發(fā)抗RT全人治療性單克隆抗體提供技術(shù)支撐。
圖1 抗RT全人單克隆抗體鑒定
圖2 抗RT中和抗體能力鑒定結(jié)果
圖3 DMAb-IgG 小鼠預(yù)防保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果